Μέθοδος PCR για ακρίβεια μόλυνσης από τον ιό HIV. Πώς να κάνετε εξετάσεις για HIV PCR; Γιατί η PCR είναι καλύτερη από την ELISA για την ανίχνευση του HIV;

Ο ιός της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας είναι μια από τις πιο τρομερές ασθένειες του παρελθόντος και του παρόντος. Η μελέτη του, η αναζήτηση εμβολίων και φαρμάκων αποδίδει ορισμένους καρπούς. Ωστόσο, μέχρι σήμερα, οι ειδικοί γιατροί δεν έχουν καταφέρει να νικήσουν εντελώς αυτήν την επικίνδυνη ασθένεια. Οι σύγχρονες διαγνωστικές μέθοδοι καθιστούν δυνατό όχι μόνο τον εντοπισμό του ιού της ανοσοανεπάρκειας σε πρώιμο στάδιο, αλλά και την παρακολούθηση της πορείας της νόσου στο μέλλον. Για να ληφθεί μια απόφαση σχετικά με την ανάγκη χρήσης μιας συγκεκριμένης θεραπείας, χρησιμοποιείται ανάλυση HIV RNA. Χρησιμοποιείται επίσης για τον εντοπισμό αυτής της ασθένειας. Είναι σημαντικό να σημειωθεί εδώ ότι η εξέταση HIV RNA δεν είναι καθολική. Χρησιμοποιήστε το μόνο όταν είναι απαραίτητο. Πώς γίνεται μια τέτοια έρευνα, σε ποιες περιπτώσεις χρησιμοποιείται και ποια είναι η αξιοπιστία της;

Ιός HIV μέσω RNA: η ουσία της μελέτης

Πριν μιλήσετε για τον τρόπο προσδιορισμού του HIV RNA, θα πρέπει να μάθετε τι σημαίνει αυτή η συντομογραφία και τι ρόλο παίζει στο σώμα. Το ριβονουκλεϊκό οξύ είναι ένα μόριο που βρίσκεται σε όλους τους ζωντανούς οργανισμούς και σε ορισμένες ιογενείς λοιμώξεις. Η σύνθεση αυτού του μορίου βασίζεται σε μια μήτρα δεοξυριβονουκλεϊκού οξέος. Ορισμένα ένζυμα είναι υπεύθυνα για αυτές τις διαδικασίες. Αυτές είναι πολυμεράσες ριβονουκλεϊκού οξέος.

Η ουσία αυτού του τύπου έρευνας είναι ο έλεγχος του γενετικού υλικού του ιού. Προκειμένου να πραγματοποιηθεί μια δοκιμή RNA για τον HIV, οι ειδικοί γιατροί χρησιμοποιούν την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης. Η PCR σάς επιτρέπει να αυξήσετε επανειλημμένα τον όγκο του βιολογικού υλικού που χρησιμοποιείται για έρευνα, λόγω του οποίου δοκιμάζεται σε διάφορα στάδια χρησιμοποιώντας μια συγκριτική μέθοδο. Αξίζει να σημειωθεί ότι το RNA PCR δεν χρησιμοποιείται μόνο για τον HIV. Αυτή η τεχνική σάς επιτρέπει να αναγνωρίσετε μεγάλο αριθμό κληρονομικών ασθενειών, ορισμένων ιών και λοιμώξεων. Χρησιμοποιείται επίσης για τον προσδιορισμό κληρονομικών γενετικών παθολογιών. Ως βιολογικό υλικό χρησιμοποιούνται σπέρμα, σάλιο και αίμα. Στην περίπτωση του ιού της ανοσοανεπάρκειας, ο ορός και το πλάσμα θεωρούνται τα προτιμώμενα υλικά.

Το τεστ HIV RNA πραγματοποιείται σε διάφορα στάδια. Αφού ληφθεί το αίμα του ασθενούς, αποστέλλεται στο εργαστήριο. Το βιολογικό υλικό τοποθετείται σε ειδικό αντιδραστήρα, όπου διασπάται. Για τη σύνθεση χρησιμοποιούνται ειδικά ένζυμα. Στη συνέχεια, κάτω από τεχνητά δημιουργημένες συνθήκες, δύο μόρια RNA συντίθενται από ένα μόριο RNA, τέσσερα από δύο κ.ο.κ. Όταν επιτευχθεί ο απαιτούμενος αριθμός, γίνεται σύγκριση με διαφορετικούς τύπους ιών. Παρεμπιπτόντως, η έξοδος από ένα μόριο ριβονουκλεϊκού οξέος είναι αρκετές εκατοντάδες ή χιλιάδες μόρια. Το υπερευαίσθητο HIV RNA διατίθεται σε διάφορους τύπους. Όλα εξαρτώνται από τον σκοπό της έρευνας.

HIV RNA 20 IU/ml: ακρίβεια και αξιοπιστία της μεθόδου, τύποι

Στη σύγχρονη ιατρική, χρησιμοποιούνται δύο μέθοδοι μελέτης του ριβονουκλεϊκού οξέος. Είναι περίπουσχετικά με το ποσοτικό και ποιοτικό HIV RNA. Και οι δύο αυτές μέθοδοι έρευνας είναι παρόμοιες, αλλά έχουν διαφορετικούς στόχους. Η ποσοτικοποίηση του HIV RNA είναι ο προσδιορισμός του ιικού φορτίου. Ο αριθμός των μορίων του ιού στον γενετικό ιστό μπορεί να μιλήσει πολλά. Συγκεκριμένα, σε ποιο στάδιο βρίσκεται η ασθένεια αυτή τη στιγμή. Όλοι γνωρίζουν ότι ο ιός της ανοσοανεπάρκειας έχει πολλά από αυτά. Μετά την ορομετατροπή, ο αριθμός των κυττάρων του ιού αυξάνεται και η ανίχνευσή του καθίσταται δυνατή. Στα αρχικά στάδια της νόσου, το ποσοτικό HIV RNA, ο κανόνας του οποίου καθορίζεται στο εργαστήριο, επιτρέπει όχι μόνο την ανίχνευση του ιού της ανοσοανεπάρκειας, αλλά και τη λήψη απόφασης σχετικά με την ανάγκη λήψης αντιρετροϊκής θεραπείας. Έχοντας καθορίσει το ποσοτικό ιικό φορτίο, ο ειδικός μπορεί να αποφασίσει ποιο θεραπευτικό σχήμα πρέπει να χρησιμοποιήσει ο ασθενής.

Η ποιότητα του HIV RNA για νεογνά χρησιμοποιείται συχνά. Μπορεί επίσης να πραγματοποιηθεί σε ενήλικες, για παράδειγμα, προκειμένου να προσδιοριστεί ο τύπος του ιού. Αλλά το κόστος μιας τέτοιας έρευνας δεν επιτρέπει την εφαρμογή της σε όλα τα ιατρικά ιδρύματα. Ως εκ τούτου, χρησιμοποιείται στην παιδιατρική και τη νεογνολογία.

Η αξιοπιστία του τεστ HIV RNA με ευαισθησία 20 IU/ml είναι υψηλή. Είναι περίπου ενενήντα ένα τοις εκατό. Ωστόσο, στη σύγχρονη ιατρική υπάρχουν μέθοδοι των οποίων η αξιοπιστία είναι μεγαλύτερη. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο χρησιμοποιείται μια συνδεδεμένη με ένζυμο ανοσοπροσροφητική δοκιμασία ή ανοσοστύπωμα για να προσδιοριστεί η παρουσία ή η απουσία αυτής της διάγνωσης. Η αξιοπιστία τους είναι ελαφρώς υψηλότερη. Είναι ενενήντα οκτώ έως ενενήντα εννέα τοις εκατό.

Αν μιλάμε για τον βέλτιστο χρόνο για τη δοκιμή, οι γιατροί το συνταγογραφούν τουλάχιστον ένα μήνα μετά τη μόλυνση. Εάν ο κύριος στόχος είναι να προσδιοριστεί εάν ο ασθενής έχει μια δεδομένη διάγνωση, δεν αξίζει τον κόπο να γίνει μια εξέταση HIV RNA μετά από 4 εβδομάδες· η αξιοπιστία της μπορεί να είναι ανακριβής. Είναι καλύτερα να το κάνετε αυτό σε πέντε έως έξι εβδομάδες.

Εάν το RNA του HIV δεν ανιχνεύεται, τι σημαίνει αυτό; Αυτή η ερώτηση τίθεται συχνά σε επαγγελματίες υγείας. Αυτό μπορεί να σημαίνει ότι ο ιός ανοσοανεπάρκειας δεν υπάρχει ή μπορεί να υποδεικνύει ότι το τεστ έγινε πολύ νωρίς.

Ανίχνευση HIV με μέθοδο RNA σε νεογνά: ποια είναι η αποτελεσματικότητα;

Η προτιμώμενη μέθοδος ελέγχου των νεογνών για την παρουσία ή την απουσία ιού ανοσοανεπάρκειας εάν γεννιούνται από μολυσμένη μητέρα είναι η εξέταση ριβονουκλεϊκού οξέος. Σε αυτή την περίπτωση, παράγονται 20 IU/ml HIV RNA τις πρώτες 10 ημέρες της ζωής του μωρού. Είναι επίσης δυνατό να ανιχνευθεί η παρουσία της νόσου χρησιμοποιώντας ενζυμική ανοσοδοκιμασία. Ωστόσο, οι γιατροί αντιμετωπίζουν μια διαφορετική πρόκληση. Μιλάμε για την ανάγκη προσδιορισμού των αντισωμάτων που παράγει το σώμα του μωρού. Γεγονός είναι ότι ένα μωρό που γεννιέται από μολυσμένη μητέρα θα τα έχει σε κάθε περίπτωση. Ωστόσο, μερικές φορές αυτό είναι απλώς μια άμυνα του ανοσοποιητικού συστήματος και όχι το γεγονός της μόλυνσης. Η ακρίβεια της HIV RNA PCR ελέγχεται εκ νέου μετά από 6 μήνες.

Η HIV PCR είναι μια από τις πιο κατατοπιστικές μεθόδους μοριακής γενετικής διάγνωσης. Αυτή η μέθοδος βοηθά στον εντοπισμό διαφόρων ειδών μολυσματικών παθήσεων και ασθενειών στον ασθενή που κληρονομούνται. Η ίδια διαγνωστική μέθοδος ισχύει και στην περίπτωση ελέγχου βιοϋλικού για την παρουσία HIV, μιας σοβαρής ασθένειας που αναπτύσσεται σε όλη τη διάρκεια της ζωής του ασθενούς. ΜΕ ιατρική φροντίδαΗ PCR ήταν μεταξύ των συνιστώμενων εξετάσεων που πραγματοποιήθηκαν επί πληρωμή σε περιπτώσεις υποψίας ιού ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας. Ωστόσο, η αξιοπιστία της μελέτης δικαιολογείται μόνο σε 80 από τις 100 περιπτώσεις.

Το PCR diagnostics για τον HIV σημαίνει αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης. Για αυτού του είδους την έρευνα χρησιμοποιούν Διάφοροι τύποιβιολογικά υλικά. Μεταξύ αυτών είναι αίμα, επιπλέον, μπορεί να χρησιμοποιηθεί έκκριση από τον κόλπο του ασθενούς ή το σπερματικό υγρό στους άνδρες.

Προσοχή! Το σάλιο δεν χρησιμοποιείται για PCR στη διάγνωση του HIV. Αυτή η προσέγγιση θεωρείται αναποτελεσματική, καθώς τα αντισώματα κατά του HIV βρίσκονται σε ελάχιστη συγκέντρωση σε αυτό το υλικό. Το ίδιο ισχύει για τα ούρα, τον ιδρώτα και τα δάκρυα.

Η ένδειξη για την περιγραφόμενη μελέτη είναι μια διπλή θετική ELISA (ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία). Εναλλακτικές εργασίες θα συζητηθούν αργότερα.

Λεπτομέρειες για την ουσία της ανάλυσης


Το τεστ PCR για τον HIV βασίζεται στην ικανότητα του νουκλεϊκού οξέος να αναπαράγεται ανεξάρτητα. Τα ζωντανά κύτταρα αποτελούνται από πρωτεΐνη και αυτά τα ίδια οξέα, με άλλα λόγια, RNA και DNA. Τα μόρια λειτουργούν ως φύλακες του γενετικού κώδικα.
Σε χαμηλή συγκέντρωση ιικών σωματιδίων (HIV) στο βιοϋλικό, το δείγμα δεν περιλαμβάνει ολόκληρες αλυσίδες DNA (δεοξυριβονουκλεϊκό οξύ), αλλά μόνο τα συστατικά τους, που ονομάζονται νουκλεοτίδια. Η ανάλυση σάς επιτρέπει να ανιχνεύσετε ακόμη και μικρά υπολείμματα κυττάρων ιού. Αυτό είναι το γεγονός που εξηγεί την ικανότητα της PCR να επιδεικνύει αποτελέσματα πρώιμα στάδια– λίγες εβδομάδες μετά τη μόλυνση από τον ιό HIV.

Τα καλύτερα αποτελέσματα από την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης μπορούν να αναμένονται κατά την εξέταση του φλεβικού αίματος. Το δείγμα υποβάλλεται σε πέψη χρησιμοποιώντας εξοπλισμό. Τα κλάσματα στη συνέχεια υποβάλλονται σε ενζυματική επεξεργασία. Οι αντιδραστικές ουσίες συνδυάζονται με σωματίδια DNA του ιού για να το διπλασιάσουν. Ο αριθμός τέτοιων στοιχείων αυξάνεται σύμφωνα με την αρχή της αλυσίδας έως ότου η παρουσία τους (όχι αντισώματα) στο αίμα του ασθενούς γίνει αισθητή στους τεχνικούς εργαστηρίου. Καμία από τις υπάρχουσες διαγνωστικές μεθόδους δεν λειτουργεί ακριβώς με την ίδια αρχή.


Συστατικά αντίδρασης

Χρησιμοποιώντας τη μέθοδο PCR, μπορείτε να μάθετε εκ των προτέρων για την ανάπτυξη του ιού στο σώμα. Γιατί δεν μπορεί να ονομαστεί δημοφιλής στον τομέα της δωρεάν ιατρικής και να γίνεται παντού; Το γεγονός είναι ότι ένα τέτοιο τεστ HIV είναι πολύ ακριβό και απαιτεί τα ακόλουθα συστατικά:

  • μια μήτρα δεοξυριβονουκλεϊκού οξέος που περιλαμβάνει ένα τμήμα DNA που προορίζεται για ενίσχυση.
  • δύο εκκινητές (για κάθε τμήμα αλυσίδας).
  • ένα χημικά ενεργό συστατικό πολυμεράσης για την επιτάχυνση του πολυμερισμού των ιικών σωματιδίων.
  • τριφωσφορικοί δεοξυριβονουκλεοζίτες;
  • δισθενή σωματίδια μαγνησίου (φορτισμένα).
  • μια ειδική λύση για τη δημιουργία ευνοϊκών συνθηκών, διασφαλίζοντας το κατάλληλο επίπεδο οξύτητας, συγκέντρωση αλατιού και τον αριθμό των σωματιδίων μαγνησίου στο υγρό.

Προσοχή! Για την προστασία του δείγματος από υπερθέρμανση, προστίθεται στο υλικό μια μικρή ποσότητα βαζελίνης, η οποία περιέχει λίπη και, κατά συνέπεια, υψηλό σημείο βρασμού.

Το σχετικά υψηλό ποσοστό ακρίβειας της ανάλυσης εξηγείται από την αυξημένη ευαισθησία της, η οποία διεγείρει μια αντίδραση σε αντισώματα σε άλλους ιούς.

Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της τεχνικής PCR για τον HIV

Για να αξιολογήσουμε αντικειμενικά τη μέθοδο, παρουσιάζουμε στον παρακάτω πίνακα μια σειρά από πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της μελέτης:

πλεονεκτήματα Μειονεκτήματα
– αρκετά υψηλό ποσοστό ακρίβειας (ανιχνεύει τον ιό στο 80% των περιπτώσεων)

– ευελιξία (για έρευνα χρησιμοποιούν όχι μόνο αίμα, αλλά και κολπικές εκκρίσεις και σπέρμα)

– ευρύ φάσμα μεθόδων (ένα δείγμα βιολογικού υλικού μπορεί να ελεγχθεί για πολλές ασθένειες)

– ταχύτητα λήψης αποτελεσμάτων (ο ασθενής λαμβάνει απάντηση την επόμενη μέρα – οι εξπρές μέθοδοι είναι πιο αποτελεσματικές από αυτή την άποψη)

– υψηλή ευαισθησία (η διάγνωση είναι δυνατή στα πρώιμα στάδια της ανάπτυξης του HIV, κάτι που δεν μπορεί να ειπωθεί για ELISA ή γενική εξέταση αίματος για μόλυνση)

– χωρίς περιορισμούς ηλικίας (μια τέτοια εξέταση αίματος για HIV μπορεί να ληφθεί από ένα παιδί από τη στιγμή της γέννησής του)

υψηλή τιμή

– την ανάγκη χρήσης εξοπλισμού υψηλής τεχνολογίας

– 20% ψευδώς θετικών αποτελεσμάτων (λόγω της υψηλής ευαισθησίας της μεθόδου)

Προφανώς, υπάρχουν περισσότερα πλεονεκτήματα της τεχνικής. Εάν αξιολογήσουμε το είδος της διάγνωσης από την άποψη της παραγωγικότητας της περαιτέρω θεραπείας και της δυνατότητας παράτασης της ζωής του ασθενούς, η PCR είναι ο πιο σίγουρος δρόμος για την επιτυχία.

Χαρακτηριστικά της ανάλυσης


Το κύριο χαρακτηριστικό της περιγραφόμενης ανάλυσης είναι η ικανότητά της να διαγνώσει έγκαιρα τον HIV, κάτι που άλλες ερευνητικές μέθοδοι δεν είναι ικανές. Πόσες ημέρες μετά την ύποπτη μόλυνση μπορώ να δωρίσω αίμα για PCR; Συνήθως αυτή η χρονική περίοδος είναι 10-14 ημέρες. Μέσα στις επόμενες 24 ώρες, ο ασθενής λαμβάνει το αποτέλεσμα. Πιθανές αποκλίσεις στις προθεσμίες εξηγούνται από τις επιμέρους συνθήκες λειτουργίας των διαγνωστικών κέντρων και των κλινικών.

Σκοπός έρευνας

Η PCR πραγματοποιείται κυρίως για την ανίχνευση του HIV (σύνδρομο ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας). Ωστόσο, το τεστ μπορεί επίσης να γίνει εάν υποψιάζεστε την ανάπτυξη σεξουαλικά μεταδιδόμενων νοσημάτων. Η ίδια μέθοδος εφαρμόζεται και στην περίπτωση της διάγνωσης κληρονομικών ασθενειών.

Διαγνωστικά PDR: λόγοι διεξαγωγής

Πότε πρέπει να δώσετε αίμα για PCR; Στις περισσότερες περιπτώσεις, το βιολογικό υλικό χαρίζεται όταν ο ιός της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας έχει προσαρμοστεί στις συνθήκες του σώματος, διεγείρει την παραγωγή αντισωμάτων και προκαλεί τα πρώτα συμπτώματα του HIV. Ωστόσο, αυτό δικαιολογείται μόνο εάν έχει περάσει αρκετός χρόνος μετά τη μόλυνση και απαιτείται ELISA.

Η ανάγκη για PCR προκύπτει με πρωτοβουλία του ασθενούς που θέλει να διαγνώσει έγκαιρα τη νόσο (εάν υπάρχει). Ο λόγος για αυτό μπορεί να είναι: απροστάτευτη σεξουαλική επαφή, επαφή με βιολογικό υλικό ενός μολυσμένου ατόμου, πρόσφατη μετάγγιση αίματος κ.λπ.

Σε ποιον συνταγογραφείται η PCR;

Ο προσδιορισμός της λοίμωξης από τον ιό HIV με χρήση PCR, κατόπιν σύστασης ειδικού, πραγματοποιείται στις ακόλουθες περιπτώσεις:

  • προκαταρκτική διάγνωση.Η PCR επιβεβαιώνει ή διαψεύδει με ακρίβεια το αποτέλεσμα ELISA.
  • Η ανοσοστύπωση επιβεβαίωσε τη διάγνωση. Το ανοσοποιητικό στύπωμα είναι ένας επιπλέον τρόπος για τη μελέτη του AIDS . Και οι δύο μέθοδοι χρησιμοποιούνται μαζί, γεγονός που εξαλείφει την πιθανότητα λανθασμένης διάγνωσης.
  • με επιβεβαιωμένη κατάσταση HIVχρησιμοποιώντας PCR, παρακολουθείται η επίδραση της επιλεγμένης θεραπείας.
  • για ανάλυση αίματος δοτώνγια την παρουσία αντισωμάτων HIV·
  • για τον προσδιορισμό της κατάστασης HIV ενός νεογνού όταν η μητέρα είναι θετική. Η PCR στις πρώτες ημέρες της ζωής καθιστά δυνατό τον προσδιορισμό της ενδομήτριας λοίμωξης ή μόλυνσης του μωρού κατά τη διέλευση από το κανάλι γέννησης. Η εξέταση πραγματοποιείται 2-3 εβδομάδες μετά τη γέννηση.

Πόσος χρόνος χρειάζεται για να γίνει μια εξέταση PCR και πού μπορεί να γίνει;

Η ανάλυση HIV PCR πραγματοποιείται σε ειδικό εργαστήριο. Η ίδια η δοκιμή και η ερμηνεία του αποτελέσματος δεν απαιτούν πολύ χρόνο: ένα μήνα ή ακόμα και μια εβδομάδα. Χρειάζονται έως και 6 λεπτά για την αιμοληψία. Σε μια κανονική περίπτωση, ένας ειδικός δεν θα χρειαστεί περισσότερο από μία ημέρα για να κάνει μια διάγνωση και να εκδώσει ένα συμπέρασμα. Οι πρώτες 8 ώρες αφιερώνονται στη μελέτη του αίματος, ο υπόλοιπος χρόνος αφιερώνεται στην εγγραφή. Το αποτέλεσμα μπορεί να συλλεχθεί την επόμενη μέρα μετά τη λήψη του δείγματος. Η διάρκεια του express test είναι 2 ώρες.

Προσοχή! Το υποχρεωτικό συμβόλαιο ιατρικής ασφάλισης καθιστά δυνατή τη δωρεάν συμμετοχή στο τεστ κρατική υπηρεσίαφροντίδα υγείας.

Σχεδόν κάθε εμπορικό εργαστήριο είναι σε θέση να διεξάγει έρευνα και σε ανώνυμη βάση. Στο άτομο εκχωρείται ένας ειδικός αριθμός, στον οποίο στη συνέχεια συνδέονται τα αποτελέσματα. Αυτές οι πληροφορίες μεταφορτώνονται στον ιστότοπο του ιδρύματος στον προσωπικό λογαριασμό του χρήστη.

Πόσο κοστίζει η εξέταση PCR;

Αυτή η μέθοδος διεξαγωγής έρευνας είναι αρκετά δαπανηρή. Αυτό οφείλεται στο γεγονός ότι η PCR πρέπει να πραγματοποιείται με τον πιο πρόσφατο ιατρικό εξοπλισμό· ο χειρισμός απαιτεί από τους ειδικούς να έχουν επαρκή γνώση.

Το πιεστικό ερώτημα είναι: πόσο κοστίζει ένα άτομο να κάνει μια εξέταση PCR για HIV; Αυτό θα απαιτήσει περίπου 56-60 $.

Διενέργεια ανάλυσης

Η εξέταση PCR για HIV περιλαμβάνει:

  • Δειγματοληψία αίματος για έρευνα·
  • πρόσθετη συλλογή σπέρματος από άνδρα και γεννητικών εκκρίσεων από γυναίκα.

Προσοχή! Ως αποτέλεσμα, το τεστ επιτρέπει στους γιατρούς να προσδιορίσουν ένα υψηλό ιικό φορτίο προκειμένου να παρακολουθήσουν την κατάσταση του ασθενούς.

Άλλα χαρακτηριστικά αυτού του τεστ HIV που πρέπει να ληφθούν υπόψη:

  • μερικές ημέρες πριν από τη δοκιμή, ο ασθενής πρέπει να μειώσει την ποσότητα των λιπαρών τροφών στη διατροφή.
  • Το αίμα λαμβάνεται με άδειο στομάχι.
  • Ένζυμα που συνθέτουν διάφορες μολύνσεις προστίθενται στα διαχωρισμένα βιολογικά υλικά σε έναν ειδικό αντιδραστήρα.
  • η ανάλυση πραγματοποιείται σε διάφορα στάδια, αφού η διαίρεση των μορίων γίνεται με αριθμητική πρόοδο. Ένα ειδικό πρόγραμμα κάνει τη σύγκριση μεγάλη ποσότητακυτταρικές δομές για την ανίχνευση του HIV.

Οι ακριβείς διαγνωστικές μέθοδοι, οι οποίες περιλαμβάνουν την PCR, είναι ακριβές, αλλά είναι ικανές να ανιχνεύσουν τον ιό HIV στα αρχικά στάδια. Στη θεραπεία τέτοιων παθολογιών, το πιο σημαντικό είναι η σωστή και έγκαιρη διάγνωση, η οποία μπορεί να βελτιώσει την ποιότητα ζωής του ατόμου και τη διάρκειά της.

.

Η HIV λοίμωξη είναι μια σοβαρή ιογενής νόσος με μακρά ασυμπτωματική περίοδο, που χαρακτηρίζεται από βλάβες στο ανθρώπινο ανοσοποιητικό σύστημα και επικίνδυνη λόγω της καθυστερημένης διάγνωσής της. Συχνά οι όροι «HIV» και «AIDS» χρησιμοποιούνται ως συνώνυμοι, αλλά στην πραγματικότητα, το AIDS είναι το τελικό (τελευταίο) στάδιο της μόλυνσης από τον ιό HIV, η διάρκεια του οποίου είναι 1-2 χρόνια. Σύμφωνα με έρευνες, από τη στιγμή της μόλυνσης έως ότου η νόσος εισέλθει στο τελικό στάδιο ελλείψει θεραπείας, περνούν κατά μέσο όρο 9-11 χρόνια. Η έγκαιρη διάγνωση της νόσου χρησιμοποιώντας ανάλυση ELISA ή PCR για τον HIV σας επιτρέπει να ξεκινήσετε έγκαιρα την αντιρετροϊκή θεραπεία, να σταματήσετε την εξέλιξη της νόσου και να ζήσετε μια πλήρη ζωή για πολλά χρόνια, παρά την παρουσία του ιού της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας στο σώμα.

Οδοί μετάδοσης του HIV:

  • απροστάτευτη σεξουαλική επαφή.
  • μετάγγιση αίματος και προϊόντων αίματος·
  • χρήση μη αποστειρωμένων οργάνων κατά τη διάρκεια ιατρικών παρεμβάσεων.
  • τραυματισμοί ιατρικού προσωπικού με μη αποστειρωμένα εργαλεία·
  • περιγεννητική λοίμωξη: μετάδοση του ιού κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης και του τοκετού.

Οι εξετάσεις για το AIDS (HIV) συνταγογραφούνται:

  • κατά τη διάρκεια περιστασιακής σεξουαλικής επαφής.
  • κατά τον προγραμματισμό της εγκυμοσύνης και κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης.
  • σε προετοιμασία για νοσηλεία·
  • με ξαφνική απώλεια βάρους?
  • με παρατεταμένη αύξηση της θερμοκρασίας του σώματος άγνωστης προέλευσης.

Γρήγορη εξέταση αίματος για HIV

Ο HIV ανήκει στην οικογένεια των ρετροϊών (Retroviridae), στην υποοικογένεια των φακοϊών (Lentivirus). Όταν εισέρχεται στο ανθρώπινο σώμα, επηρεάζει τα κύτταρα του ανοσοποιητικού συστήματος: Τ-βοηθητικά κύτταρα, μακροφάγα και δενδριτικά κύτταρα. Ο ρετροϊός μετατρέπει το RNA του σε ένα κομμάτι DNA, το οποίο ενσωματώνεται στο γονιδίωμα του κυττάρου ξενιστή. Όταν το προσβεβλημένο κύτταρο διαιρείται, τα θυγατρικά κύτταρα λαμβάνουν το ιικό γονιδίωμα. Το σώμα παράγει αντισώματα έναντι των αντιγόνων του ιού στην επιφάνεια των μολυσμένων κυττάρων, η ανίχνευση των οποίων χρησιμοποιείται για τη διάγνωση της λοίμωξης HIV χρησιμοποιώντας την ενζυμική ανοσοπροσροφητική δοκιμασία (ELISA). Συνιστάται να κάνετε το τεστ 1,5 - 3 μήνες μετά τη στιγμή της υποψίας μόλυνσης· νωρίτερα η εξέταση ELISA δεν είναι ενημερωτική. Εργαστηριακές χρήσεις Hemotest εναλλακτική μέθοδος Real-Time PCR (PCR με ανίχνευση προϊόντων σε πραγματικό χρόνο), που ανιχνεύει όχι αντισώματα στον HIV, αλλά τον ίδιο τον ιό στον οργανισμό. Διαθέτοντας υψηλή ευαισθησία και αξιοπιστία, η μέθοδος σας επιτρέπει να ανιχνεύσετε ακόμη και μεμονωμένα σωματίδια του ιού μετά από 10 ημέρες (μέσος όρος) από τη στιγμή της πιθανής μόλυνσης, όταν ακόμα δεν υπάρχουν αντισώματα στο αίμα.
  • για την ανίχνευση του ιού κατά τη διάρκεια του «οροαρνητικού παραθύρου»·
  • εάν το αποτέλεσμα ανοσοστύπωσης είναι αμφίβολο.
  • για τον προσδιορισμό του γονότυπου του ιού - HIV-1 ή HIV-2.
  • για τον έλεγχο του ιικού φορτίου στο σώμα.
  • για τον προσδιορισμό της κατάστασης HIV των νεογνών εάν η μητέρα είναι μολυσμένη από τον ιό HIV.
  • μετά από μετάγγιση αίματος.

Ανώνυμο τεστ HIV

Σύμφωνα με τη ρήτρα 2, άρθρο 8 του Ομοσπονδιακού Νόμου της Ρωσικής Ομοσπονδίας Αρ. 38-FZ, ένας ασθενής μπορεί να κάνει ανώνυμα τεστ HIV και να λάβει το αποτέλεσμα χρησιμοποιώντας έναν ατομικό αριθμό παραγγελίας, ο οποίος δεν υπόκειται σε αποκάλυψη. Για όσους για κάποιο λόγο δεν μπορούν να έρθουν για εξέταση σε ένα από τα τμήματα του Hemotest Laboratory, συνιστούμε να χρησιμοποιήσουν την υπηρεσία νοσοκόμας που επισκέπτεται για αιμοληψία και στη συνέχεια να καταχωρίσετε το δείγμα που λήφθηκε ως ανώνυμη παραγγελία.

Εφιστήστε την προσοχή σας σε:τα αποτελέσματα των ανώνυμων εξετάσεων για το AIDS (HIV) δεν μπορούν να χρησιμοποιηθούν για επαγγελματικές εξετάσεις, νοσηλεία ή παροχή στον θεράποντα ιατρό σε κλινική.

Τα αποτελέσματα ενός τεστ HIV, ανεξάρτητα από την έκβασή τους, εκδίδονται μόνο εάν ο ασθενής επικοινωνήσει προσωπικά με το εργαστηριακό τμήμα. Κατά την εξέταση ανηλίκων (κάτω των 14 ετών) - στον νόμιμο εκπρόσωπο που καθορίζεται στην παραγγελία.

Τα αποτελέσματα εκδίδονται με την προσκόμιση συμβολαίου, εκτίμησης και εγγράφου ταυτοποίησης του ίδιου του ασθενούς ή του εκπροσώπου του ασθενούς που καθορίζεται στην παραγγελία.

Τηλεφωνικά και ΗΛΕΚΤΡΟΝΙΚΗ ΔΙΕΥΘΥΝΣΗτα αποτελέσματα της μελέτης δεν αναφέρονται.

ΕΑΝ ΣΥΓΓΡΑΦΕΙ ΤΕΣΤ για HIV ΓΙΑ ΣΚΟΠΟΥΣ ΠΡΟΕΤΟΙΜΑΣΙΑΣ ΓΙΑ ΝΟΣΟΚΟΜΕΙΟ Ή ΓΙΑ ΠΑΡΟΧΗ ΣΕ ΚΑΤΑΣΤΑΣΗ ΥΓΕΙΑΣ, Η ΚΑΤΑΧΩΡΗΣΗ ΑΙΤΗΣΕΩΝ ΓΙΑ ΑΥΤΟ ΓΙΝΕΤΑΙ με την επιφύλαξη της υποχρεωτικής παροχής από τον ασθενή των εξής στοιχείων:

1) Για κατοίκους της Μόσχας και της περιοχής της Μόσχας

  • Πλήρες όνομα
  • Ημέρα, μήνας και έτος γέννησης
  • Πληροφορίες για τις εγγραφές
  • Διαβατήριο
  • Ασφαλιστήριο συμβόλαιο (σειρά και αριθμός πολιτική ασφαλείας, επωνυμία της ασφαλιστικής εταιρείας).
2) Για κατοίκους άλλων περιοχών της Ρωσικής Ομοσπονδίας και αλλοδαποί πολίτεςεπιπλέον – φωτοτυπία (σάρωση) του διαβατηρίου.
  • Πλήρες όνομα
  • Ημέρα, μήνας και έτος γέννησης
  • Πληροφορίες για τις εγγραφές
  • Ασφαλιστήριο συμβόλαιο (σειρά και αριθμός του ασφαλιστηρίου συμβολαίου, επωνυμία ασφαλιστικής εταιρείας)
  • Φωτοτυπία (σάρωση) διαβατηρίου

Πόσος χρόνος χρειάζεται για την εξέταση για HIV;

Τα αποτελέσματα της δοκιμής ELISA μπορούν να ληφθούν εντός 1 εργάσιμης ημέρας, αλλά όχι νωρίτερα από 1,5-3 μήνες από την ημερομηνία ύποπτης μόλυνσης· το αποτέλεσμα της διάγνωσης PCR μπορεί να βρεθεί εντός 10 ημερών από την ημερομηνία ύποπτης μόλυνσης. Ο χρόνος διεκπεραίωσης για μια δοκιμή PCR σε πραγματικό χρόνο είναι 3 εργάσιμες ημέρες.

Δεν έχει βρεθεί ακόμη μέθοδος για τη θεραπεία της νόσου που προκαλείται από τον ιό της ανθρώπινης ανοσοανεπάρκειας. Αλλά τα διαγνωστικά έχουν επιτύχει σοβαρή επιτυχία. Ένα τεστ HIV που πραγματοποιείται με τη μέθοδο PCR είναι μία από τις επιλογές για την ανίχνευση του ιού στον οργανισμό.

Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης ή PCR, είναι μια από τις σύγχρονες μεθόδους για τη διάγνωση του HIV. Βασίζεται στην ικανότητα των νουκλεϊκών οξέων να αναπαράγονται. Το κύτταρο οποιουδήποτε ζωντανού οργανισμού περιλαμβάνει πρωτεΐνες και νουκλεϊκά οξέα:

  • RNA - ριβονουκλεϊκό οξύ,
  • DNA - δεοξυριβονουκλεϊκό οξύ.

Αυτά τα μακρομόρια αποθηκεύουν τον γενετικό κώδικα. Εάν η συγκέντρωση των ιικών κυττάρων στο αίμα είναι χαμηλή, το δείγμα δεν περιέχει ολόκληρες αλυσίδες DNA, αλλά τα μεμονωμένα «δομικά στοιχεία» τους - νουκλεοτίδια. Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης ανιχνεύει ακόμη και τέτοια «θραύσματα» ιικών κυττάρων. Αυτό σας επιτρέπει να έχετε αποτελέσματα νωρίς μετά από μια πιθανή μόλυνση, όταν τα πρώτα κλινικά συμπτώματα δεν έχουν ακόμη εμφανιστεί.

Το πιο ακριβές αποτέλεσμα μπορεί να ληφθεί χρησιμοποιώντας φλεβικό αίμα για ανάλυση. Λίγες μέρες πριν από την εξέταση. Σταματήστε τη λήψη ανοσοδιεγερτικών φαρμάκων 2 εβδομάδες πριν.

Ένα δείγμα βιοϋλικού χωνεύεται σε αντιδραστήρα ιατρικού εργαστηρίου. Τα κλάσματα στη συνέχεια υποβάλλονται σε επεξεργασία με ένζυμα. Τα αντιδραστήρια συνδυάζονται με το DNA του μορίου του ιού και το αντιγράφουν. Από ένα κελί παίρνετε 2, από 2 - 4, μετά 8. Ο αριθμός αυξάνεται εκθετικά. Η αλυσιδωτή αντίδραση επιτρέπει βραχυπρόθεσμανα αυξήσει την ποσότητα του ιικού συστατικού και να το κάνει ορατό στους τεχνικούς του εργαστηρίου.

Ο κανόνας είναι ένα αρνητικό αποτέλεσμα δοκιμής, το οποίο μοιάζει με αυτό: «Δεν ανιχνεύθηκε DNA ιού». Αυτή είναι η τιμή αναφοράς (στατιστικός μέσος όρος).

Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της τεχνικής PCR για τον HIV

Η διάγνωση του HIV χρησιμοποιώντας PCR έχει αναμφισβήτητα πλεονεκτήματα, αλλά υπάρχουν και σημαντικά μειονεκτήματα. Τα πρώτα περιλαμβάνουν:

  • Υψηλή ακρίβεια. Η πιθανότητα λήψης ψευδώς αρνητικών αποτελεσμάτων είναι εξαιρετικά χαμηλή.
  • Ευστροφία. Δεν είναι μόνο το αίμα κατάλληλο για έρευνα, αλλά και άλλα βιολογικά υγρά (κολπικές εκκρίσεις, σπέρμα). Χρησιμοποιούνται επίσης σάλιο και ούρα, αλλά η ακρίβεια του αποτελέσματος θα είναι μικρότερη. Σε αυτά τα περιβάλλοντα, η συγκέντρωση των ιικών κυττάρων είναι ασήμαντη.
  • Ευρύ φάσμα αναλύσεων. Ένα δείγμα βιοϋλικού μπορεί να ελεγχθεί για διάφορες ασθένειες.
  • Ταχύτητα εκτέλεσης. Η αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης είναι μια επείγουσα διαγνωστική μέθοδος. Μπορείτε να μάθετε την απάντηση την επόμενη κιόλας μέρα.
  • Η αυτοπεποίθηση είναι 80%. Χρησιμοποιώντας τη μέθοδο PCR, τα ιικά σωματίδια μπορούν να ανιχνευθούν, ακόμη και αν η συγκέντρωσή τους είναι χαμηλή. Αυτό επιτρέπει τη διάγνωση της νόσου πρώιμα στάδιακαι ξεκινήστε έγκαιρα τη θεραπεία.
  • Έγκαιρη διάγνωση της λοίμωξης HIV. Ο χρόνος ανίχνευσης του HIV στο αίμα με χρήση PCR είναι 10-14 ημέρες μετά την ύποπτη μόλυνση. Αυτό είναι το τυπικό διάστημα για τη διάγνωση του ιού της ανοσοανεπάρκειας. σε αυτό το στάδιο δεν έχουν εντοπιστεί ακόμη. η μέθοδος ELISA δεν λειτουργεί.
  • Δεν υπάρχουν περιορισμοί ηλικίας. Αυτή η εξέταση μπορεί να πραγματοποιηθεί σε ένα παιδί από τη στιγμή της γέννησης.

Μειονεκτήματα της μεθόδου PCR στη διάγνωση του HIV:

  • Υψηλότερο κόστος σε σύγκριση με την ενζυμική ανοσοδοκιμασία 3ης γενιάς.
  • Απαιτεί εξελιγμένο ιατρικό εξοπλισμό.
  • Το σφάλμα είναι 20% λόγω της υψηλής ευαισθησίας της αντίδρασης. Για αυτοάνοσα νοσήματα, κακοήθεις όγκους, χρόνιους λοιμώξεις PCRμπορεί να δώσει ψευδώς θετικό αποτέλεσμα.

Ποιος χρειάζεται PCR;

  • Απαιτείται έγκαιρη ανταπόκριση για προκαταρκτική διάγνωση. Η PCR βοηθά στην επιβεβαίωση ή τη διάψευση των αποτελεσμάτων ELISA.
  • Η ανοσοστύπωση έδωσε θετικό αποτέλεσμα. Εάν πρώτα πραγματοποιηθεί ανάλυση PCR, τότε η επιβεβαίωση του αποτελέσματος με ανοσοστύπωμα είναι υποχρεωτική. Η έρευνα αλληλοσυμπληρώνεται. Χρησιμοποιώντας 2 μεθόδους ταυτόχρονα, οι γιατροί εξαλείφουν την πιθανότητα σφαλμάτων.
  • Μόλις επιβεβαιωθεί το θετικό, η PCR βοηθά στην παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας.
  • Χρησιμοποιείται για τον έλεγχο της παρουσίας του αίματος του δότη.
  • Η PCR μπορεί να γίνει ακόμη και σε παιδιά κάτω του ενός έτους. Αυτή η μέθοδος χρησιμοποιείται για να διαπιστωθεί η κατάσταση του HIV σε νεογνά των οποίων οι μητέρες είναι φορείς του ιού. Μια εξέταση που θα γίνει τις πρώτες ημέρες της ζωής θα δείξει εάν έχει εμφανιστεί ενδομήτρια λοίμωξη. Η μόλυνση θα μπορούσε να συμβεί ενώ το μωρό περνούσε από το κανάλι γέννησης. που αποκτάται από το μωρό κατά τον τοκετό μπορεί να εντοπιστεί μετά από 2 - 3 εβδομάδες.

Πόσος χρόνος χρειάζεται για να κάνω μια εξέταση PCR και πού μπορώ να την πάρω;

Η διεξαγωγή ενός τεστ PCR για τον HIV και η αποκρυπτογράφηση των αποτελεσμάτων δεν απαιτεί πολύ χρόνο. Η αιμοληψία διαρκεί 5-7 λεπτά. Στην τυπική περίπτωση, ο τεχνικός εργαστηρίου χρειάζεται μόνο 24 ώρες για να προετοιμάσει το πιστοποιητικό. Η διάγνωση δεν διαρκεί περισσότερο από 8 ώρες, ο υπόλοιπος χρόνος απαιτείται για την εγγραφή. Ο ασθενής λαμβάνει την αναφορά την επόμενη εργάσιμη ημέρα. εκτελέστε μέσα σε 2 ώρες.

Ο έλεγχος HIV με αυτόν τον τρόπο δεν πραγματοποιείται στο πλαίσιο του υποχρεωτικού ασφαλιστηρίου συμβολαίου ιατρικής περίθαλψης. Δεν μπορείτε να λάβετε αυτήν την υπηρεσία δωρεάν σε δημόσια κλινική. Αλλά σχεδόν όλα τα εμπορικά εργαστήρια έχουν συνήθως απαραίτητο εξοπλισμόκαι αντιδραστήρια. Η εξέταση PCR συχνά περιλαμβάνεται στον γενικό έλεγχο HIV. Η τιμή των σύνθετων διαγνωστικών κυμαίνεται από 600 έως 1000 ρούβλια.

Μπορείτε να ολοκληρώσετε τη διαδικασία ανώνυμα. Στην υποδοχή δίνεται στον ασθενή ένας ατομικός αριθμός με τον οποίο θα μάθει το αποτέλεσμα. Τα σύγχρονα ιατρικά κέντρα εμφανίζουν όλα τα δεδομένα στον ιστότοπό τους ΠΡΟΣΩΠΙΚΟΣ ΛΟΓΑΡΙΑΣΜΟΣπελάτης.